應用結(jié)核分枝桿菌特異性抗原對待檢者全血中分離出的T細胞進行體外刺激,感染了結(jié)核分枝桿菌的待檢者的T細胞可對這種體外刺激產(chǎn)生特異性的反應,變成特異性效應T細胞,產(chǎn)生γ干擾素。通過酶聯(lián)免疫斑點(ELISPOT)方法可對結(jié)核特異性效應T細胞進行檢測,并對其反應斑點進行計數(shù),從而判斷待檢者是否感染結(jié)核分枝桿菌。QB-SPOT產(chǎn)品可用于結(jié)核分枝桿菌感染后特異性T細胞免疫的體外檢測,適用于結(jié)核疑似病例的臨床輔助診斷和潛伏感染篩查。
從全血樣本中分離出外周血單個核細胞(PBMCs),與結(jié)核桿菌特異性抗原一起孵育,當外周血中存在針對結(jié)核桿菌的效應T淋巴細胞時,結(jié)核桿菌特異性抗原將刺激這些效應T淋巴細胞分泌IFN-γ。分泌的細胞因子被預包被在反應孔膜上的特異抗體捕獲,細胞和其它不必要的物質(zhì)通過洗滌被去除。加入生物素標記的檢測抗體與被捕獲的IFN-γ結(jié)合,辣根過氧化物酶通過親和素與生物素特異性結(jié)合,顯色底物溶液在反應部位被酶分解并最終形成斑點。每一個斑點代表一個分泌IFN-γ的效應T淋巴細胞。通過對斑點進行計數(shù)可以判斷體內(nèi)是否存在對結(jié)核桿菌反應的效應 T細胞,從而對結(jié)核病進行輔助診斷。
1.十二五國家科技重大專項支持項目
2.研制單位:中國科學院微生物研究所、中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所、北京3.曠博生物技術(shù)有限公司
3.中華人民共和國國家知識產(chǎn)權(quán)局專利授權(quán)產(chǎn)品(專利號:ZL 2012 1 0090659.1)
4.特異性抗原:ESAT-6、CFP-10、Rv3615c,專為亞洲結(jié)核感染人群設計
5.針對結(jié)核分枝桿菌感染設計,對絕大多數(shù)環(huán)境分支桿菌和卡介苗無交叉反應
6.不受免疫力低下/抑制影響
7.操作簡單,結(jié)果快速
結(jié)核科、呼吸科、感染科、風濕免疫科、消化科、兒科、血液科、內(nèi)分泌科、腎內(nèi)科、皮膚科、心內(nèi)科、眼科、骨科、生殖中心、器官移植中心。
1.結(jié)核病輔助診斷 /療效評價,“菌陰”結(jié)核病患者的輔助診斷,肺外結(jié)核的鑒別診斷
2.免疫力低下或受抑制患者的結(jié)核診斷或感染篩查,
3.使用生物制劑或免疫抑制劑患者的結(jié)核感染篩查,腫瘤壞死因子抑制劑應用前篩查
4.腎透析患者或器官移植前結(jié)核病感染狀態(tài)的篩查
5.兒童結(jié)核病的輔助診斷
6.結(jié)核密切接觸者 /高危人群的結(jié)核感染篩查
7.結(jié)核病患者的家屬 /醫(yī)務工作者 /監(jiān)獄囚犯/家政服務/移民
8.接觸追蹤/流行病學調(diào)查
9.高危人群結(jié)核病的篩查:糖尿病、HIV等